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Suministros de laboratorio Kasalab le ofrece Sondeo de Células y Tejidos en Tapetes Microbianos y Hojas MICROFIBER-PAM entre su amplia gama de equipos para laboratorio para la venta en Perú.

El MICROFIBER-PAM utiliza fibras ópticas delgadas (100 µm) para la excitación y detección de fluorescencia. La fibra delgada permite sondear puntos pequeños de superficies fotosintéticas heterogéneas como las costras del suelo.

Una “fibra de trabajo” (MF-F, accesorio), que se inserta en una hoja o en una estera fotosintética, mide los gradientes fotosintéticos dentro de la muestra. Para facilitar la penetración, la fibra de trabajo se puede extraer hasta una punta cónica de 10 a 30 μm.

Propiedades destacadas de la MICROFIBRA-PAM

El sistema de fibra óptica del MICROFIBER-PAM consta de dos pares de fibras ópticas. Un acoplador de fibra óptica conecta ópticamente las fibras. Dos fibras unen la fuente de luz y el fotomultiplicador, respectivamente, a un extremo del acoplador de fibra óptica. Las otras dos fibras unen la muestra al extremo opuesto del acoplador de fibra óptica.

Para las mediciones de fluorescencia, el acoplador de fibra óptica guía la luz desde el LED a través de una única fibra hasta la muestra, y transmite la fluorescencia emitida por la muestra al fotomultiplicador. Los filtros de color impiden que la luz del LED llegue al fotomultiplicador. Para medir la atenuación de la luz, las dos fibras de muestra se colocan en lados opuestos del objeto de estudio y se retiran los filtros de color (consulte las figuras 1 y 2 a continuación).

La excitación y detección de fluorescencia están controladas por la unidad PAM-CONTROL, que permite el funcionamiento independiente del MICROFIBER-PAM pero también funciona como interfaz para el funcionamiento del sistema mediante un ordenador con Windows.

La unidad PAM-CONTROL puede ser operada por el software WinControl versiones 2 ó 3. El sistema incluye, un cable RS-232, un adaptador USB-RS-232 (cuando no hay un puerto RS-232 disponible), un cargador MINI-PAM/L, un cable para conectar un registrador gráfico, una caja de transporte y un soporte (ST-101).

Diagrama funcional MICROFIBRA-PAM

Medición de fluorescencia (Fig. 1): La luz azul pasa a través de un filtro de paso corto que transmite luz solo en longitudes de onda menores a 600 nm (MF-L470). Una fibra guía la luz LED hasta el acoplador de fibra óptica de cuatro puertos, MF-2-2-100. Otra fibra dirige la luz LED desde allí hasta la muestra y guía la fluorescencia de regreso al acoplador de fibra óptica. Luego, la luz LED y la fluorescencia se transmiten por fibra óptica al fotomultiplicador (PM-MF).

Al fotomultiplicador solo llega la luz fluorescente, ya que está protegido contra la luz LED azul mediante filtros de paso largo que transmiten luz solo en longitudes de onda superiores a 640 nm. El adaptador de fibra para el fotomultiplicador forma parte del juego de adaptadores MICROFIBER-PAM, MF-A. El juego de adaptadores MF-A también incluye un soporte para el LED azul y tres LED adicionales. Medición de atenuación de luz (Fig. 2): Sin los filtros de color delante del LED y del fotomultiplicador, y con las puntas de las dos fibras de muestra orientadas cara a cara, el MICROFIBER-PAM detecta la luz de medición azul transmitida por el sistema de fibra óptica al fotomultiplicador. Una muestra colocada entre las puntas de las fibras reduce la intensidad de la luz azul que llega al fotomultiplicador. El grado de atenuación de luz de una muestra se puede derivar de la señal del fotomultiplicador.

Unidad de control universal PAM-CONTROL

La unidad PAM-CONTROL se puede utilizar para realizar mediciones de fluorescencia PAM independientemente de una computadora, pero también actúa como interfaz entre el fluorómetro y una computadora Windows que ejecute la versión 2 o 3 del software WinControl.

La unidad PAM-CONTROL forma parte de varios sistemas PAM, todos ellos con un tubo fotomultiplicador de alta sensibilidad para la detección de fluorescencia: el MICROSCOPY-PAM, el MICROFIBER-PAM y el WATER-PAM FIBER Version. En los tres sistemas, un procedimiento de apagado automático protege el tubo fotomultiplicador contra daños causados ​​por altos niveles de fluorescencia o luz externa.

La memoria de la unidad puede almacenar 4000 conjuntos de datos. Un amplio menú proporciona un control total de los ajustes del instrumento y una variedad de protocolos de medición.

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Solicitud de MICROFIBRA-PAM

Gradientes de fotoinhibición de PS II dependientes de la longitud de onda

Una opción que ofrece el MICROFIBER-PAM es la investigación de gradientes de características del fotosistema II dentro de la hoja. Para tales investigaciones, la punta puntiaguda de una fibra de trabajo (MF-F) se introduce en el tejido de la hoja mediante un micromanipulador y se realiza un análisis de pulsos de saturación a profundidades de penetración definidas.

Utilizando esta estrategia, Terashima y sus colegas han analizado cómo la luz intensa de diferentes colores daña el fotosistema II a distintas distancias de la superficie de la hoja. Al medir el rendimiento cuántico fotoquímico máximo del fotosistema II (F V /F M), los autores demostraron que la amplitud, así como los gradientes de fotoinhibición de la hoja, dependen del color de la luz fotoinhibitoria.

Especificaciones de MICROFIBRA-PAM

Suministros de laboratorio Kasalab le ofrece Sistema de fluorescencia de clorofila IMAGING-PAM Series M entre su amplia gama de equipos para laboratorio para la venta en Perú.

Introducción sobre el Sistema de fluorescencia de clorofila IMAGING-PAM Series M

La familia IMAGING-PAM comprende las versiones MAXI, MINI y MICROSCOPY. Las diferentes versiones utilizan la misma unidad de control múltiple IMAG-CG. Además, la misma cámara puede utilizarse para diferentes versiones. Este modularidad permite cambiar de forma sencilla y económica entre las distintas aplicaciones y aumentos que ofrece la serie M de IMAGING-PAM. Las versiones MAXI y MINI se pueden combinar con el sistema de intercambio de gases GFS-3000 y, de esta manera, integran información espacial detallada sobre la fotosíntesis con un análisis exacto de la fijación de carbono fotosintético. Recientemente, se ha añadido a la versión MAXI un método avanzado para crear imágenes tridimensionales de plantas. Esta nueva configuración abre la posibilidad de proyectar datos de análisis de fluorescencia sobre la imagen tridimensional de la planta, de modo que se pueda analizar la fotosíntesis en el contexto de la arquitectura de toda la planta.

Propiedades destacadas de la familia IMAGING-PAM

Elevando la fluorescencia de la clorofila al nivel 3D

La nueva integración de un escáner 3D de precisión en la probada versión MAXI del fluorómetro IMAGING-PAM combina el análisis de pulsos de saturación con el conocimiento del tamaño, número, posición y ángulo de las hojas. Como resultado, se puede considerar la intensidad de luz efectiva por unidad de superficie foliar cuando se evalúan los efectos de la luz en la fotosíntesis o la fotoinhibición.

La configuración 3D proporciona una multitud de datos morfológicos adicionales para el fenotipado estructural de las plantas. Juntos, los parámetros morfológicos y los parámetros funcionales caracterizados fluorométricamente forman un nuevo ámbito en el fenotipado de plantas.

Fluorescencia de clorofila y fluorometría PAM

La fluorescencia de la clorofila es un indicador muy sensible de la fotosíntesis. La información cuantitativa sobre el rendimiento cuántico de la conversión de energía fotosintética se obtiene mediante la fluorometría PAM y el método de pulso de saturación (Schreiber U (2004) Pulse-Amplitude-Modulation (PAM) Fluorometry and Saturation Pulse Method: An Overview, pp. 279-319. Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, Países Bajos) .

Las mediciones de fluorescencia pueden generar una amplia gama de parámetros fotosintéticos, lo que proporciona información sobre el estado fisiológico de todos los organismos fotosintéticamente activos, incluidas plantas superiores, musgos y helechos, así como diversos tipos de algas, fitoplancton y biopelículas.

Imágenes de fluorescencia de clorofila

Con el avance de las cámaras CCD de alta sensibilidad y de los diodos emisores de luz (LED) extremadamente potentes, se ha hecho posible el desarrollo de los fluorómetros IMAGING-PAM, que no solo miden imágenes de la fluorescencia de la clorofila, sino que también son totalmente capaces de proporcionar todos los parámetros relevantes de la fluorescencia de la clorofila mediante el método de pulso de saturación. De esta manera, se pueden obtener imágenes de la actividad fotosintética y sus variaciones espaciotemporales.

Todos los fluorómetros IMAGING-PAM proporcionan imágenes de 17 parámetros diferentes. El parámetro de fluorescencia Ft se controla de forma continua. Fo y Fm se evalúan tras la adaptación a la oscuridad, lo que sirve como referencia para el análisis de extinción de la fluorescencia mediante el método de pulso de saturación.

Además de Fv/Fm, se pueden obtener imágenes del rendimiento cuántico de PS II después de la aclimatación a la oscuridad, también del rendimiento cuántico de PS II durante la iluminación, Y(II), y de los rendimientos cuánticos de disipación de energía regulada y no regulada, Y(NPQ), Y(NO), así como de la tasa aparente de transporte de electrones (ETR y PS).

Se proporciona una rutina para medir una imagen de absortividad PAR para las versiones MAXI y MINI del IMAGING-PAM (imagen Abs. basada en imágenes de NIR y remisión de luz roja). A partir de este parámetro también se calcula la tasa aparente de fotosíntesis y ya no es necesario utilizar el valor medio de absortividad PAR conocido comúnmente de 0,84 (ETR) para todas las áreas.

El parámetro PS/50 se muestra para representar la fotosíntesis aparente con ayuda del código de color falso que también se utiliza para los demás parámetros de la fotosíntesis.

Características generales IMAGING-PAM Serie M

La nueva versión 3D de IMAGING-PAM es especialmente adecuada para mediciones precisas de partes aéreas completas de plantas de muestra. Mide la altura exacta de las hojas y proporciona una descripción numérica clara de hojas individuales (tamaño, forma, ángulo, punto de equilibrio) y plantas enteras (radio de roseta, área de superficie y número de hojas).

Las versiones MAXI, MINI y MICROSCOPY están disponibles en varias configuraciones para diferentes aplicaciones, que difieren en geometrías ópticas y longitudes de onda de excitación. Mientras que la luz de excitación azul se utiliza normalmente para la obtención de imágenes de fluorescencia de plantas superiores y algas, se recomienda la excitación rojo-anaranjada para las cianobacterias.

Los cabezales de medición también pueden equiparse con LED especiales y conjuntos de filtros para obtener imágenes de fluorescencia de moléculas indicadoras como GFP. El uso de LED de potencia permite intensidades actínicas de hasta 5000 μmol m -2 s -1 (según el miembro de la Serie M y la configuración).

Para la medición de suspensiones se encuentran disponibles placas de filtro adicionales que mejoran la calidad de la imagen incluso con superficies reflectantes. Para mediciones PSII en condiciones de luz ambiental también es posible la comunicación con nuestro fotómetro universal ULM-500, de modo que los valores de luz en tiempo real se pueden transferir directamente al archivo de informe IMAGING-PAM.

Para la combinación de diferentes técnicas de medición como por ejemplo el intercambio de gases, hay adaptadores disponibles de modo que la obtención de imágenes PSII también se puede realizar bajo control climático combinado.

Configuraciones de las versiones 3D, MAXI, MINI y MICROSCOPY

Unidad de control múltipleImagen-CG
Cabezal de mediciónIMAG-MAX/L
(azul)
IMAG-MAX/LR
(rojo)
IMAG-MIN/B
(azul)
IMAG-MIN/R
(rojo)
IMAG-MIN/GFP
(GFP)
IMAG-L470M5
(azul)
IMAG-L625M5
(rojo anaranjado)
IMAG-RGB
(verde rojo azul)
Cámara CCD y lentesIMAG-K7
(lente zoom
K7-MAX/Z o lente fija
IMAG-MAX/S)
IMAG-K6
(lente fija
K6-MAX)
IMAG-K7
(lente fija
K7-MIN)
IMAG-K6
(lente fija
K6-MIN)
IMAG-K6
(lente fija
K6-MIN y portaobjetos con filtro detector
K6-MIN/FS)
Imagen-K6
Kit de montaje para cámaraK7-MAX/M o K6-MAX/MK7-MIN/M o K6-MIN/M 
Microscopio  IMAG-AXIOSCOPIO 5
MontajeIMAG-MAX/GS
IMAG-MAX/B
ST-101
IMAG-MAX/HF
IMÁGENES-MÍN/BK
IMÁGENES-MÍN/ST
IMÁGENES-S
 
ComputadoraImagen por ordenador
OpcionalIMÁGENES-MAX/FincluidoST-1010módulos reflectores adicionales
IMAG-AX-REF
Combinación de sistemasImagen-MAX/GWK1IMÁGENES-MIN/GFS 

Especificaciones para la versión IMAGING-PAM SERIE M

Suministros de laboratorio Kasalab le ofrece Fluorómetro compacto para el seguimiento a largo plazo de la fotosíntesis MICRO-PAM entre su amplia gama de equipos para laboratorio para la venta en Perú.

Introducción

Un sistema MICRO-PAM consta de varios fluorómetros de clorofila livianos para uso en el campo. Al ser capaz de monitorear la fotosíntesis en múltiples sitios durante semanas y meses, el MICRO-PAM está diseñado para estudiar las respuestas de las plantas a los cambios ambientales en la naturaleza y en condiciones controladas. Debido a sus cabezales de medición compactos, el MICRO-PAM es adecuado para muestras más pequeñas que las que se analizan normalmente con el MONITORING-PAM establecido.

El MICRO-PAM fue desarrollado originalmente para medir la fotosíntesis de líquenes que crecen sobre rocas o en costras biológicas del suelo. El campo de aplicación actual incluye plantas herbáceas, arbustos y árboles. Además de determinar el rendimiento de la fotosíntesis mediante la técnica de pulso de saturación, los cabezales de medición registran la intensidad de la luz y la temperatura mediante sensores externos, y la humedad mediante un sensor interno.

Propiedades destacadas del MICRO-PAM

Características generales MICRO-PAM

Los cabezales de medición de un sistema MICRO-PAM se denominan MICRO-HEAD/3B, donde el “3” especifica el diámetro en mm de la guía de luz y la “B” representa el color azul de la luz de medición y actínica.

El MICRO-HEAD/3B posee un LED de potencia azul con emisión máxima a 465 nm y un ancho completo a la mitad de su longitud máxima de 22 nm. La intensidad máxima de luz actínica a nivel de muestra es de 3000 μmol m -2 s -1, la intensidad máxima del pulso de saturación es de 8000 μmol m -2 s -1. El MICRO-HEAD/3B está equipado con un clip de muestra. Un sensor PAR de respuesta coseno se coloca paralelo al plano de la muestra. Un termopar que toca el lado inferior de la muestra mide la temperatura. La humedad se mide mediante un sensor de tipo capacitivo ubicado dentro de la carcasa del fluorómetro. A pedido, se proporcionará un soporte especial para montar el MICRO-HEAD/3B en superficies sólidas. Los sistemas MICRO-PAM pueden funcionar en la configuración ONLINE, en la que se pueden conectar hasta cuatro cabezales de medición a través de la caja de interfaz para PC MONI-IB4/LAN a un puerto USB de un ordenador con Windows que ejecute WinControl-3. En la configuración OFFLINE, los cabezales de medición se conectan directamente o a través del denominado MINI-HUB a un sistema de adquisición de datos MONI-DA.

Comparación de sistemas de monitoreo

SistemaMICRO-PAMMoni-pam
Cabezal de mediciónMICRO-CABEZA/3BCABEZA MONI/485
Peso96 gramos205 gramos
Volumen189 cm3365 cm3
Sensor PARExternoInterno
Sensor de temperaturaExterno (Termopar)Interno
Sensor de humedadInternoAusente
Vía ópticaFibraLente
Resistencia al climaRecubrimiento de circuitos electrónicos para protegerlos contra la humedad.Carcasa impermeable
Versión submarinaNo disponibleDisponible
El consumo de energía3 W durante SP máx.7 W durante SP máximo

Cabezales de medición versión AZUL y ÁMBAR
MICRO‑HEAD/3B y MICRO‑HEAD/3A

Los sistemas MICRO-PAM se pueden configurar con los cabezales de medición MICRO-HEAD/3B y MICRO-HEAD/3A. El cabezal de medición MICRO-HEAD/3B analiza la fotosíntesis con luz azul, que tiene una intensidad máxima a 460 nm y un ancho completo a la mitad de su longitud máxima de 27 nm (Fig. 1). Los sistemas MICRO-PAM y MONI-PAM que emplean luz azul han demostrado su eficacia en la investigación terrestre y acuática.

El cabezal de medición MICRO-HEAD/3A posee un LED ámbar con un pico de emisión a 598 nm y un ancho completo a la mitad de su longitud máxima de 22 nm (Fig. 1). Las cianobacterias absorben mejor la luz ámbar que la luz azul. En consecuencia, la calidad de la señal PAM excitada por la luz ámbar es superior a la excitada por la luz azul. Por este motivo, los sistemas MICRO-PAM configurados con cabezales de medición MICRO-HEAD/3A son especialmente adecuados para sondear esteras y líquenes de cianobacterias o costras que contengan cianobacterias.

Las versiones AZUL y ÁMBAR se distinguen además por la ventana espectral para la detección de fluorescencia. La versión AZUL detecta la fluorescencia en longitudes de onda > 600 nm, mientras que la versión ÁMBAR detecta la fluorescencia en longitudes de onda > 700 nm (Fig. 2).

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Espectros de emisión de LED típicos normalizados a sus valores máximos. La curva azul corresponde al espectro del LED azul del cabezal de medición MICRO-HEAD/3B, la curva ámbar representa la emisión del LED ámbar del cabezal de medición MICRO-HEAD/3A. Se muestran las longitudes de onda de pico y el ancho total a la mitad del máximo (entre corchetes) en nm.
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Espectros de transmitancia de los filtros de detección en el cabezal de medición MICRO‑HEAD/3B (versión AZUL, línea roja) y el cabezal de medición MICRO‑HEAD/3A (versión ÁMBAR, línea roja oscura).

Configuración ONLINE de MICRO-PAM

En la configuración ONLINE, el sistema MICRO-PAM se maneja mediante el software WinControl 3 que se ejecuta en un ordenador con Windows. Se pueden conectar hasta 4 MICRO HEAD/3B a un puerto USB de ordenador mediante la caja de interfaz para PC MONI-IB4/LAN. La longitud estándar del cable entre la caja de interfaz para PC MONI-IB4/LAN y el MICRO HEAD/3B es de 10 m.

La caja de interfaz para PC MONI-IB4/LAN permite la integración de la configuración en línea en una red de área local (LAN). El puerto Ethernet puede estar situado a una distancia de hasta 100 m de la MONI-IB4/LAN. Para aplicaciones especiales, la caja de interfaz también ofrece comunicación RS 232.

Especificaciones MICRO-PAM ONLINE

Configuración INDEPENDIENTE de MICRO-PAM

La configuración INDEPENDIENTE incluye el sistema de adquisición de datos MONI-DA, que permite el funcionamiento con baterías del sistema MICRO-PAM. La configuración INDEPENDIENTE incluye paneles solares que permiten la adquisición de datos durante períodos muy largos de tiempo, independientemente de la red eléctrica. Un módem opcional envía datos en tiempo real a un servidor dedicado para que el usuario los descargue.

El distribuidor de cuatro vías MICRO-HUB conecta 4 cabezales de medición MICRO-HEAD/3B a un único puerto del MONI-DA. El número máximo de cabezales de medición MICRO-HEAD/3B por MONI-DA es 16. Como el MONI-DA tiene 7 puertos de entrada, el número de 16 se logra utilizando 3 interfaces MICRO-HUB que conectan cada un 4 cabezal de medición al MONI-DA y vinculan directamente otros 4 cabezales de medición al MONI-DA.

Especificaciones INDEPENDIENTE de MICRO-PAM

Aplicaciones para MICRO-PAM

Datos en tiempo real

Vea cómo responde la fotosíntesis a la intensidad de la luz y la temperatura. Un sistema MICRO-PAM instalado cerca de la casa de los Walz envía datos en vivo a través de un módem a un servidor Walz dedicado. Después de cada pulso de saturación, se agrega un conjunto completo de datos al registro existente. El sistema MICRO-PAM consta de 6 cabezales de medición, una unidad de adquisición de datos MONI-DA y un módem. Elija entre 3 tipos de gráficos: Y(II) + PAR, Y(II) + ETR o Temperatura + PAR + Humedad. Puede descargar los datos y visualizarlos utilizando el software WinControl-3 .

Aclimatación de las hojas al frío

Se utilizó un sistema MICRO-PAM para monitorear la aclimatación del fotosistema II a la disminución de la temperatura en otoño. Se realizaron experimentos al aire libre con hojas de acebo ( Ilex aquifolium ) del 9 de octubre al 6 de noviembre de 2019. Posición: latitud: 49.656564 | longitud: 11.09793. Durante el período de monitoreo, el F M ' máximo mostró una tendencia a disminuir y exhibió valores más bajos entre los días 20 y 24 (Fig. 1). En promedio, el PAR fue mayor en la parte inicial del experimento en comparación con la parte final, pero no se observó una disminución comparable con el F M ' (Fig. 2). La temperatura mostró una tendencia a la baja, al igual que en el caso de F M ', los valores mínimos se registraron entre los días 20 y 24. El análisis de la relación entre la temperatura máxima de F M ' y la mínima mediante regresión lineal arrojó un coeficiente de determinación de 0,6 (Fig. 4), lo que sugiere que los dos parámetros están relacionados entre sí. La extinción no fotoquímica sostenida podría ser un factor involucrado en esta relación fluorescencia/temperatura.

Fotosíntesis de líquenes (Prototipo MICRO-PAM)

Los prototipos de los cabezales de medición MICRO-HEAD/3B se han utilizado con éxito para monitorear la fotosíntesis de líquenes que crecen en condiciones climáticas extremas. Los sitios experimentales incluyen Tierra del Fuego y la Antártida. El siguiente cartel describe la configuración experimental y muestra datos a largo plazo de PAR, temperatura, rendimiento del fotosistema II y tasa de transporte de electrones calculada.

Suministros de laboratorio Kasalab le ofrece Sistema de fluorescencia de clorofila Maxi IMAGING-PAM Serie M entre su amplia gama de equipos para laboratorio para la venta en Perú.

Introducción Sistema de fluorescencia de clorofila Maxi IMAGING-PAM Serie M

La versión MAXI del IMAGING-PAM Serie M utiliza un conjunto de LED muy compacto y potente de 300 W para la iluminación homogénea de áreas de 10 x 13 cm (placas de microtitulación) con excitación modulada por pulsos, luz actínica y pulsos de saturación.

Hay dos cámaras CCD diferentes disponibles. Para aplicaciones de alta sensibilidad se recomienda la IMAG-K6 (chip de 2/3", 1392 x 1040 píxeles con agrupamiento de 4 píxeles). Para aplicaciones estándar está disponible la IMAG-K7 (chip de 1/2", 640 x 480 píxeles), que se puede utilizar junto con el potente objetivo zoom K7-MAX/Z (F1.0/f=8-48 mm). De este modo, el sistema ofrece un área de imagen de 10 x 13 cm sin escalas hasta 13 x 22 mm con resolución constante.

Para la mayoría de las aplicaciones se recomienda un soporte de montaje especial con protección ocular (IMAG-MAX/GS), que cuenta con una cubierta de plexiglás roja, a través de la cual se puede observar la fluorescencia roja de la clorofila. En la parte inferior del soporte de montaje IMAG-MAX/GS se puede colocar una platina xy para posicionamiento variable de la muestra o una placa multipocillo a una distancia de trabajo definida de 18,5 cm.

La placa inferior se puede quitar para poder levantar todo el soporte (patas incluidas) para obtener imágenes de plantas que crecen en bandejas o macetas; además, es posible combinarlo con la cubeta de intercambio de gases grande 3010-GWK1 para el GFS-3000 utilizando juegos de adaptadores opcionales.

Configuraciones de la versión MAXI

Unidad de control múltiple

Cabezal de medición

Cámara CCD y lentes

Kit de montaje para cámara

Montaje

Computadora

Opcional

Combinación de sistemas

Especificaciones de la versión MAXI IMAGING-PAM SERIE M

Suministros de laboratorio Kasalab le ofrece Sistema de fluorescencia de clorofila Hexagon-Imaging-PAM entre su amplia gama de equipos para laboratorio para la venta en Perú.

Introducción

El HEXAGON-IMAGING-PAM es el sistema de obtención de imágenes Walz más grande del mercado. A pesar de su gran área de medición, el instrumento es lo suficientemente flexible como para medir una amplia variedad de muestras, como plantas en macetas individuales, plántulas en bandejas de plantas más grandes o muestras recolectadas de plantas superiores o inferiores.
Puede medir áreas de 20 x 24 cm con una resolución de hasta 1000 x 1200 px (agrupamiento 2x2), según el principio PAM, con la máxima precisión.
A diferencia del sistema de obtención de imágenes MAXI, significativamente más pequeño, el HEXAGON-IMAGING-PAM ofrece un área de medición cuatro veces mayor que el MAXI-IMAGING-PAM más pequeño y una resolución de imagen de hasta 1,2 MP (agrupamiento desactivado). Esta alta resolución da como resultado un tamaño de píxel de 100 x 100 µm.
Durante el proceso de diseño, pusimos especial énfasis en la iluminación uniforme y sin sombras del área de medición y diseñamos la refrigeración de los paneles de manera muy eficiente para una larga vida útil de los LED. El HEXAGON-IMAGING-PAM también se puede utilizar para determinar el valor Fo' de las muestras que se están investigando. Para ello, el instrumento dispone de un panel LED rojo lejano adicional de doble circuito con el que se puede dosificar de forma muy fina la luz FR y también la luz FR con un componente rojo más alto.
El nombre HEXAGON-IMAGING-PAM deriva de la forma de los paneles individuales que forman el panel principal. La forma elegida ofrece la mejor posibilidad de lograr la iluminación ideal del área de la muestra. Las subunidades del panel de forma hexagonal más pequeñas permiten una mejor compensación de los desequilibrios de los LED para lograr resultados aún más reproducibles.
En el HEXAGON-IMAGING-PAM, la electrónica de control está integrada en el cabezal de medición, de modo que, a pesar de la gran superficie de medición, se dispone de un dispositivo bastante compacto.

Propiedades excepcionales del HEXAGON-IMAGING-PAM

Fluorescencia de clorofila y fluorometría PAM

La fluorescencia de la clorofila es un indicador muy sensible de la fotosíntesis. La información cuantitativa sobre el rendimiento cuántico de la conversión de energía fotosintética se obtiene mediante la fluorometría PAM y el método de pulso de saturación (Schreiber U (2004) Pulse-Amplitude-Modulation (PAM) Fluorometry and Saturation Pulse Method: An Overview, pp. 279-319. Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, Países Bajos).
Se puede derivar una amplia gama de parámetros fotosintéticos a partir de las mediciones de fluorescencia, lo que proporciona información sobre el estado fisiológico de todos los organismos fotosintéticamente activos, incluidas las plantas superiores, los musgos y los helechos, así como varios tipos de algas, fitoplancton y biopelículas.

Imágenes de fluorescencia de clorofila

Con el avance de las cámaras CCD de alta sensibilidad, seguidas de los modernos chips de cámara de tipo CMOS, junto con los diodos emisores de luz (LED) extremadamente potentes, se ha hecho posible el desarrollo de fluorómetros IMAGING-PAM que no solo miden imágenes de fluorescencia de clorofila sino que también son totalmente competentes para proporcionar todos los parámetros relevantes de fluorescencia de clorofila, utilizando el método de pulso de saturación. De esta manera, se pueden obtener imágenes de la actividad fotosintética y sus variaciones espacio-temporales.
En los últimos años, la tendencia ha sido cada vez más hacia cámaras CMOS de muy bajo ruido que ofrecen altas sensibilidades. La tecnología LED también está haciendo un progreso continuo para que se puedan lograr altas intensidades de irradiación con menor potencia. Un problema que a menudo se pasa por alto en los LED es el calentamiento, que provoca cambios en su rendimiento. Por ello, con el nuevo HEXAGON-IMAGING-PAM nos hemos centrado especialmente en compensar estos cambios de potencia y abrir así nuevas dimensiones de precisión de medición en la homogeneidad de la imagen y la iluminación. Esto también abre la puerta a la integración de nuevos métodos de medición en el software. Todos los fluorómetros IMAGING-PAM proporcionan imágenes para 17 parámetros diferentes. El parámetro de fluorescencia Ft se monitorea continuamente y los valores cinéticos también se pueden exportar con una velocidad de reloj de 150 ms. Fo y Fm se evalúan después de la adaptación a la oscuridad, lo que sirve como referencia para el análisis de extinción de la fluorescencia mediante el método de pulso de saturación. Además de Fv/Fm, se puede obtener imágenes del rendimiento cuántico de PS II después de la aclimatación a la oscuridad, también del rendimiento cuántico de PS II durante la iluminación, Y(II), y de los rendimientos cuánticos de disipación de energía regulada y no regulada, Y(NPQ), Y(NO), así como de la tasa aparente de transporte de electrones (ETR).

Características generales HEXAGON-IMAGING-PAM

En el desarrollo del HEXAGON-IMAGING-PAM hemos seguido los deseos de nuestros clientes y, además de una superficie ampliada, también hemos revisado el control LED para crear espacio en las especificaciones técnicas para nuevas aplicaciones. La carcasa también se ha adaptado a las múltiples aplicaciones de nuestros clientes y permite la medición de hojas, algas en recipientes y organismos bentónicos, pero también plantas enteras en macetas o bandejas de plantas sin largos tiempos de conversión.
También se ha tenido en cuenta la seguridad. Los fuertes pulsos de luz con los que trabajan los instrumentos PAM no deben dañar los ojos del experimentador. Por ello, hemos integrado un apagado de seguridad en el HEXAGON-IMAGING-PAM, que suprime todas las intensidades de luz fuertes si se abre la puerta durante un experimento.
Después de iniciar el software, el HEXAGON-IMAGING-PAM funciona en modo de agrupamiento de píxeles de 2x2 en un área de 20 x 24 cm. Sin embargo, una función de zoom especial permite al usuario hacer zoom en un cuarto libremente seleccionable del área de medición sin cambiar la resolución de la imagen. De esta forma, sin perder sensibilidad, es muy fácil trabajar con un mayor aumento en un área de medición más pequeña.

Especificaciones para la versión 3D IMAGING-PAM SERIE M

Todas las especificaciones están sujetas a cambios sin previo aviso.

Suministros de laboratorio Kasalab le ofrece Sistema de medición de fluorescencia de clorofila DUAL-PAM-100 entre su amplia gama de equipos para laboratorio para la venta en Perú.

Introducción

El sistema básico consta de un fluorómetro de clorofila PAM de alto rendimiento para analizar el fotosistema II y un espectrómetro de absorbancia de longitud de onda dual para analizar el fotosistema I. Se ha desarrollado una innovadora técnica de modulación de pulsos para medir estas dos señales simultáneamente y con una resolución temporal excepcionalmente alta. En principio, el sistema mide una señal de un solo canal junto con una señal diferencial de dos canales. En el sistema básico, estas dos señales son la fluorescencia PAM del fotosistema II y el cambio de absorción del fotosistema I. El DUAL-PAM-100 no se limita a los análisis de los fotosistemas I y II. Por ejemplo, el accesorio “módulo emisor-detector P515/535” mide los cambios de dispersión como señal de absorción de un solo canal a 535 nm, y el desplazamiento de la banda electrocrómica de la energización de la membrana como señal de dos canales con 515 nm como muestra y 550 nm como longitud de onda de referencia.

Características distintivas del DUAL-PAM-100

Versión Modular DUAL-PAM-100

El sistema de medición DUAL-PAM está disponible en versión MODULAR (DUAL-PAM-100) y en versión FIBER (DUAL-PAM/F). La versión MODULAR tiene fuentes de luz y detección de señales ubicadas en cabezales de medición separados, la muestra se coloca entre los cabezales de medición y los cambios de absorción del fotosistema I se miden en el modo de transmisión. La versión FIBER tiene fuentes de luz y detección de señales en la unidad central, la muestra se coloca frente a la fibra óptica y los cambios de absorción del fotosistema I se miden en el modo de remisión. Los cabezales de medición de la versión MODULAR se pueden intercambiar fácilmente. Mediante el uso de varios módulos accesorios, la VERSIÓN MODULAR puede medir el desplazamiento de la banda electrónica causado por la activación de la membrana, la fluorescencia de NADPH, la fluorescencia de colorantes sensibles al pH y la fluorescencia en dos bandas de onda diferentes. La versión FIBER carece de esta flexibilidad, pero puede resultar ventajosa cuando solo son de interés las actividades del fotosistema II y del fotosistema I.

Posibles combinaciones de módulos emisores-detectores

CombinaciónEntrada del dispositivo: DETECTOR 1Entrada del dispositivo: DETECTOR 2
-Emisor básico
-DUAL-E
-Detector DUAL-DB o DUAL-DR
-PS II: Fluorescencia de clorofila. Excitación azul (460 nm) o roja (620 nm). -Emisión > 700 nm
-PS I: Absorbancia de longitud de onda dual. Longitud de onda de la muestra 830 nm. Longitud de onda de referencia 870 nm
-Módulo emisor-detector P515/535:
-Emisor DUAL-EP515
-Detector DUAL-DP515
-Cambios de dispersión: Absorbancia de longitud de onda única, 535 nm
-Desplazamiento de banda electrocrómica:
absorbancia de longitud de onda dual.
-Longitud de onda de la muestra, 515 nm.
-Longitud de onda de referencia, 550 nm
-Módulo emisor-detector P515/535:
-Emisor DUAL-EP515
-Detector DUAL-DP515
-Complemento: Detector DUAL-DR
-PS II: Fluorescencia de clorofila.
-Excitación roja (620 nm).
-Emisión > 700 nm.
-Desplazamiento de banda electrocrómica:
absorbancia de longitud de onda dual.
-Longitud de onda de la muestra: 515 nm.
-Longitud de onda de referencia: 550 nm
-Módulo emisor-detector de fluorescencia de NADPH:
-Emisor DUAL-ENADPH
-Detector DUAL-DNADPH
-Complemento: Detector DUAL-DR o DUAL-DPD
-PS II: Fluorescencia de clorofila.
-Excitación roja (620 nm).
-Emisión > 700 nm.
-Formación de NADPH:
fluorescencia de NADPH.
-Excitación, UV-A (365 nm).
-Emisión, azul-verde (420-580 nm).
-Módulo emisor-detector de fluorescencia de naranja de acridina (AO):
-Emisor DUAL-EAO
-Detector DUAL-DP515
-Gradiente de protones:
fluorescencia de un colorante sensible al pH.
-Excitación, azul (455 nm).
-Emisión, verde (500-570 nm).
-Módulo emisor-detector de fluorescencia de naranja de acridina (AO):
-Emisor DUAL-EAO
-Detector DUAL-DP515
-Complemento: Detector DUAL-DR o DUAL-DPD
-PS II: Fluorescencia de clorofila.
-Excitación roja (620 nm).
-Emisión > 700 nm.
-Gradiente de protones:
fluorescencia de un colorante sensible al pH.
-Excitación, azul (455 nm).
-Emisión, verde (500-570 nm).

Especificaciones de la versión MODULAR DUAL-PAM-100

Versión FIBRA DUAL-PAM/F

La unidad de potencia y control de la versión FIBER, DUAL-PAM/F, contiene todas las fuentes de luz actínica y de medición, así como el detector de señal de fotodiodo. Se utilizan fibras ópticas para guiar la luz desde la unidad de potencia y control hasta la muestra y para dirigir la luz desde la muestra hacia atrás.

El DUAL-PAM/F está diseñado para evaluar las actividades de PS II midiendo la fluorescencia inducida por el rojo, y las actividades de PS I midiendo las intensidades de la luz reflejada a 830 y 870 nm. La versión de fibra óptica es necesaria cuando las muestras opacas no permiten mediciones de P700 en el modo de transmisión, pero también se utiliza en estudios de campo y para la detección de colecciones de plantas mutantes.

dual-pam-100-2-kasalab-colombia.jpg
Vista frontal de la versión FIBRA del DUAL-PAM-100 (DUAL-PAM/F).
dual-pam-100-4-kasalab-colombia.jpgAccesorios para DUAL-PAM/F. De izquierda a derecha: Portahojas del accesorio DUAL-BA, adaptador de fibra óptica DUAL-A, clip de hojas DUAL-LC y clip de hojas 2030-B.

Especificaciones de la versión FIBER DUAL-PAM-100

Solicitudes de DUAL-PAM-100

Varios artículos en nuestra revista de Internet (PAM Application News, PAN) informan sobre la amplia gama de aplicaciones del sistema de medición DUAL-PAM-100 y aspectos importantes de los análisis de pulsos de saturación de PS I y PS II.

Medición simultánea de la fluorescencia de la clorofila en longitudes de onda cortas y largas

Se emplearon el soporte de cabezal de medición de 90 grados DUAL-H90 y filtros ópticos especiales para medir la fluorescencia de PAM simultáneamente en el rango espectral por debajo de 700 nm (sw) y por encima de 700 nm (lw). La configuración experimental mostró que la fluorescencia sw era más variable, lo que daba como resultado mayores rendimientos fotoquímicos de PSII en comparación con la fluorescencia lw. Los rendimientos fotoquímicos de PSII aparentemente más altos se pueden explicar por los bajos niveles de fluorescencia constante del fotosistema I en la ventana espectral sw. En el rango lw, los rendimientos fotoquímicos de PSII se subestiman debido a la mayor fluorescencia de fondo del fotosistema I.

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Registro simultáneo de la fluorescencia de longitud de onda corta (sw) y longitud de onda larga (lw) de una hoja (laurel cerezo, Prunus laurocerasus L.). Se formó una curva de luz, compuesta por 7 pasos de luz con intensidad creciente, seguida de un período de oscuridad.
dual-pam-100-6-kasalab-colombia.jpgRegistro simultáneo de la fluorescencia de longitud de onda corta (sw) y longitud de onda larga (lw) de una hoja (nogal común, Juglans regia L.). Cinética de fluorescencia rápida para la determinación de F(0), F(M). En el presente ejemplo, lwF (V)/F(M) = 0,837 y swF(V) /F(M) = 0,876.

-PAN (2009) 2: 1 - 13 – Determinación de NADPH

Nuevo módulo NADPH/9-AA para el DUAL-PAM-100: Descripción, funcionamiento y ejemplos de aplicación. Por Ulrich Schreiber y Christof Klughammer. El módulo NADPH/9-AA es un nuevo accesorio del sistema DUAL-PAM-100 que excita la fluorescencia a 365 nm y detecta la fluorescencia en el rango de 420 a 580 nm. El nuevo módulo permite medir los cambios inducidos por la luz de la fluorescencia de NADPH en suspensiones de cloroplastos aislados, algas y cianobacterias. Se describen las características técnicas del módulo y se presentan ejemplos de aplicación. También se presentan mediciones simultáneas de la fluorescencia de clorofila (Chl) y NADPH. Se demuestra que los pulsos de saturación pueden servir para estimar el grado de reducción de NADP en el estado estacionario.

-PAN (2008) 1: 27 - 35 – Parámetros de rendimiento del PSII

Rendimientos cuánticos complementarios de PS II calculados a partir de parámetros de fluorescencia simples medidos mediante fluorometría PAM y el método de pulso de saturación.
Por Christof Klughammer y Ulrich Schreiber. El destino de la energía de excitación en PS II se describe de forma exhaustiva mediante los rendimientos cuánticos complementarios Y(II) + Y(NPQ) + Y(NO) = 1. Se demuestra que las expresiones simples para Y(NO) e Y(NPQ) propuestas por Genty et al. (1996), que no contienen Fo', son totalmente equivalentes a las expresiones mucho más complejas de Kramer et al. (2004) y son válidas tanto para los modelos de lago como de charco. Se analiza el significado práctico de los rendimientos cuánticos complementarios.

-PAN (2008) 1: 21 - 24 – Mutante Chl b

Monitoreo de los efectos de la reducción del tamaño de la antena PS II en los rendimientos cuánticos de los fotosistemas I y II utilizando el sistema de medición DUAL-PAM-100. Por Erhard Pfündel, Christof Klughammer y Ulrich Schreiber. Se utiliza el DUAL-PAM-100 para analizar hojas de cebada sin Chl b (Hordeum vulgare cv. Donaria mutante chlorina-f2 2800) y las hojas de tipo silvestre correspondientes. Los resultados muestran que el pequeño tamaño de la antena PS II en el mutante afecta tanto a la fotoquímica de PS I como a la de PS II.

-PAN (2008) 1: 15 - 18 – Estrés por calor

Extinción no fotoquímica de la fluorescencia y rendimientos cuánticos en PS II y PS I: análisis de las limitaciones inducidas por el calor utilizando Maxi-Imaging-PAM y DUAL-PAM-100. Por Ulrich Schreiber y Christof Klughammer. En este artículo se demuestra el gran potencial de las mediciones combinadas con la versión Maxi del Imaging-PAM y el DUAL-PAM-100.

-PAN (2008) 1: 11 - 14 – Parámetros de rendimiento PSI

Método de pulso de saturación para la evaluación de la conversión de energía en PS I. Por Christof Klughammer y Ulrich Schreiber. El artículo resume los antecedentes teóricos del método de pulso de saturación que utiliza el instrumento DUAL-PAM-100 para determinar los rendimientos cuánticos de la conversión de energía fotoquímica y la disipación de energía no fotoquímica en PS I.

-PAN (2008) 1: 1 - 10 – Potencial de membrana

Nuevo accesorio para el DUAL-PAM-100: el módulo P515/535 y ejemplos de su aplicación. Por Ulrich Schreiber y Christof Klughammer. Se describen las características técnicas del módulo P515/535 y se presentan algunos ejemplos típicos de aplicación. El dispositivo proporciona información sobre el potencial de membrana, la energización de la membrana ("dispersión") y el gradiente de protones, así como sobre los flujos de protones y electrones.

Suministros de laboratorio Kasalab le ofrece Sistema de Medición de Fluorescencia de Plastocianina, Ferredoxina y Clorofila DUAL-KLAS-NIR entre su amplia gama de equipos para laboratorio para la venta en Perú.

Introducción

El Sistema de Medición de Fluorescencia de Plastocianina, Ferredoxina y Clorofila DUAL-KLAS-NIR representa un avance significativo con respecto al sistema DUAL-PAM-100, que ya está bien establecido. El DUAL-PAM-100 emplea un par de longitudes de onda en el infrarrojo cercano (NIR) para medir los cambios de absorción relacionados con los cambios redox del centro de reacción del fotosistema I. Al utilizar cuatro pares de longitudes de onda en el NIR, el DUAL-KLAS-NIR es capaz de discriminar de manera inequívoca los cambios redox de la plastocianina (PC), el centro de reacción de PS I (P700) y la ferredoxina (Fd). Mediante la aplicación de un enfoque analítico innovador, el DUAL-KLAS-NIR adquiere las características espectrales in vivo de PC puro, P700 y Fd. Esta información espectral permite al usuario monitorear en línea los cambios redox de P700, PC y Fd, y determinar las proporciones de PC/P700 y Fd/P700. Al igual que el DUAL-PAM-100, el DUAL-KLAS-NIR también es un fluorómetro de clorofila PAM. El dispositivo puede excitar la fluorescencia mediante luz de medición PAM verde o azul. La luz verde penetra más profundamente en la hoja que la luz azul. Por lo tanto, la fluorescencia excitada por el verde incluye información de las capas más profundas de la hoja y, por lo tanto, es adecuada para la comparación con las mediciones de absorción NIR, que siempre examinan toda la hoja. El software del DUAL-KLAS-NIR comparte muchas características con el del DUAL-PAM-100. Por lo tanto, comenzar a utilizar el DUAL-KLAS-NIR es particularmente sencillo para los usuarios del DUAL-PAM-100. Mediante las rutinas de medición automatizadas del software DUAL-KLAS-NIR, se pueden realizar fácilmente incluso protocolos de medición complejos.

Características destacadas del Sistema de Medición de Fluorescencia de Plastocianina, Ferredoxina y Clorofila DUAL-KLAS-NIR

Espectros de modelos diferenciales (DMP) para la deconvolución de las señales NIR

Los espectros de absorción de P700, plastocianina (PC) y ferredoxina (Fd) son amplios y muestran pocas características en el infrarrojo cercano (NIR). Una complicación adicional es que el coeficiente de extinción de P700 es mucho más alto que el de PC, que a su vez es más alto que el coeficiente de extinción de Fd. Al elegir pares de longitudes de onda específicos, solo es posible obtener señales NIR enriquecidas en Fd (785-820 nm), o P700 (820-870 nm) o PC (870-950 nm). Para llegar a una deconvolución limpia, el software utiliza el enfoque de gráfico de modelo diferencial (DMP), que no requiere conocimiento de espectros de diferencia y la dependencia de la longitud de onda de los coeficientes de extinción diferencial. Christof Klughammer desarrolló por primera vez este método para el KLAS-100, un espectrofotómetro de matriz de LED cinético para el rango de longitud de onda de 510-570 nm. Conocemos muy bien el comportamiento de PC, P700 y Fd en condiciones estándar y, en base a ese conocimiento, podemos diseñar experimentos en los que, durante un corto período de tiempo, solo ocurran cambios redox de uno de los tres componentes (PC, P700 o Fd). Mediante la normalización de los valores determinados para las 4 señales de diferencia, se obtiene una "huella espectral" para cada componente en las condiciones experimentales dadas. Cabe señalar aquí también que los centros de hierro-azufre F A y F B ubicados en el lado aceptor del fotosistema I también pueden contribuir a la señal de Fd.

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Cambios de transmitancia de longitud de onda única en una hoja de girasol intacta inducidos bajo condiciones que favorecen cambios redox selectivos de PC, P700 y Fd. El DUAL-KLAS-NIR se utilizó en modo de haz único (Schreiber 2017, Fig. 2). Para más detalles sobre este experimento, consulte la leyenda de la Figura complementaria 4 en Klughammer y Schreiber (2016). La figura muestra que entre 780 y 820 nm, la señal de Fd disminuye en un 30%, mientras que los cambios en la señal de PC y P700 son pequeños o esencialmente cero, respectivamente. Entre 820 y 870 nm hay una gran disminución en la señal P700, mientras que el cambio de señal de PC es relativamente pequeño. El cambio en la señal de Fd también es grande (~60% de cambio), pero la intensidad de la señal de Fd en términos absolutos es mucho menor que la intensidad de la señal P700. Entre 870 y 965 nm, PC y P700 muestran una disminución comparable. El enriquecimiento de PC en este intervalo de longitud de onda es bastante pequeño, pero es lo mejor que se puede hacer. La figura ilustra dos puntos: 1. por qué se eligieron los pares de longitudes de onda particulares utilizados en DUAL-KLAS-NIR y 2. que los valores de longitud de onda precisos de estos pares son menos importantes. Si, por ejemplo, se eligen 950 nm en lugar de 965 nm, eso no afectará el enfoque de deconvolución.
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Captura de pantalla del experimento utilizado para obtener el DMP para P700. En una hoja adaptada a la luz que se ilumina con luz roja lejana, un pulso AL de 1 ms induce casi exclusivamente cambios en la señal P700.
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Espectros de modelos diferenciales de P700, PC y Fd; el software utiliza estos DMP para deconvolucionar las cuatro señales NIR.

Solicitudes para el DUAL-KLAS-NIR

El DUAL-KLAS-NIR es único en su clase, ya que proporciona señales deconvolucionadas en línea de los estados redox in vivo de P700, PC y Fd en tiempo real. Esto abre un campo de investigación completamente nuevo con aplicaciones que quizás no se nos hayan ocurrido todavía. En particular, por primera vez se puede obtener información cinética simultánea sobre la compleja interacción entre las reacciones en los lados donante y aceptor de PS I, incluida información sobre el transporte cíclico de electrones alrededor de PS I.

En todas las mediciones anteriores, la señal P700 contenía siempre contribuciones de Fd y cantidades variables de PC, dependiendo del método utilizado para reducir esta contribución. El panel C de la figura ilustra la dependencia de la intensidad de la luz del rendimiento cuántico efectivo de PSI Y(I), el rendimiento cuántico efectivo de PSII Y(II) y el rendimiento cuántico efectivo de PSII corregido para la fluorescencia de PSI Y(II)corr de Brassica napus .

En una transición de oscuridad a luz, primero comienza a acumularse PC oxidado y solo con cierto retraso el P700 oxidado. La pendiente inicial de la señal de PC limpia ahora se puede utilizar como una medida para el tamaño efectivo de la antena del PS I. La segunda figura amplía los cambios iniciales de absorbancia y muestra la gran diferencia en la pendiente inicial de PC (rojo) y P700 (azul). Para una hoja aclimatada a la oscuridad, con el lado aceptor del fotosistema I inactivo, la pendiente inicial de reducción de Fd también se puede utilizar para este propósito. La figura ilustra el retraso en la cinética de oxidación de P700 en relación con las de PC para una hoja de cebada, que tiene una relación PC/P700 relativamente alta.

tiene una ventana para visualizar los cambios simultáneos en los estados redox de P700 y PC entre sí. Esto permite una estimación de la constante de equilibrio aparente entre PC y P700. La figura muestra un ejemplo de un gráfico redox de P700 versus PC.

Durante un pulso de saturación aplicado a una hoja bien adaptada a la oscuridad, el conjunto de Fd se reduce y en un período posterior de oscuridad se vuelve a oxidar lentamente. Cuando el flujo de electrones en el lado aceptor del PSI se ha activado, la cinética de reoxidación se vuelve mucho más rápida. Después de la activación del lado aceptor del PSI, la inactivación en la oscuridad se puede seguir monitoreando la velocidad a la que el Fd se reoxida después de un pulso de sonda. Estas cinéticas se pueden ajustar con una rutina de ajuste exponencial. El Panel A ofrece ejemplos de la cinética de reoxidación del Fd ajustada con una rutina de ajuste exponencial y el Panel B muestra la cinética de inactivación en la oscuridad del lado aceptor del PSI para una hoja de Hedera helix .

Los cambios máximos de transmitancia NIR de PC, P700 y Fd son proporcionales al contenido de estos compuestos en la hoja/muestra y las proporciones de los coeficientes de extinción de PC, P700 y Fd son constantes. Esto hace posible investigar las proporciones PC/P700 y Fd/P700 y, por lo tanto, los tamaños relativos de los depósitos de PC y Fd en diferentes especies o bajo diferentes condiciones (por ejemplo, sol/sombra, estrés/no estrés) de manera rutinaria con el DUAL-KLAS-NIR. Se observa que las proporciones altas de PC/P700 se correlacionan con valores altos de ETR. La figura ilustra que las hojas de sol y sombra de, en este caso, Hedera helix tienen contenidos de PC y Fd considerablemente diferentes en relación con P700.

Especificaciones para DUAL-KLAS-NIR

Suministros de laboratorio Kasalab le ofrece Fluorómetro subacuático con espectrómetro en miniatura Diving-PAM-II entre su amplia gama de equipos para laboratorio para la venta en Perú.

Introducción

El Fluorómetro subacuático con espectrómetro en miniatura Diving-PAM-II es un equipo para laboratorios que utiliza exclusivamente LED como fuente de luz interna, lo que permite una sincronización exacta de los procesos de conmutación y evita el sobrecalentamiento por iluminación continua. Un sensor PAR integrado registra continuamente la intensidad de la luz interna. Una pantalla en blanco y negro de bajo consumo muestra los datos y ajustes de forma numérica y gráfica. El sistema DIVING-PAM-II incluye un espectrómetro en miniatura MINI-SPEC para medir los espectros de PAR, que varían significativamente con la profundidad del agua. El PAR externo total se calcula automáticamente. El espectrómetro también permite realizar análisis espectrales de la emisión de fluorescencia y la reflectancia de la muestra.

El fluorómetro DIVING-PAM-II, de forma cilíndrica, está aprobado para su uso en aguas de hasta 50 m de profundidad. Los sensores avanzados registran la presión y la temperatura. Se utiliza un LED de alta potencia para la luz actínica y los pulsos de saturación. Se instala un LED rojo lejano para la excitación específica de PS I. Una fibra óptica probada conecta la muestra y el DIVING-PAM-II. Todos los parámetros relevantes del análisis de pulsos de saturación se calculan automáticamente.

Aplicaciones del Fluorómetro subacuático con espectrómetro en miniatura Diving-PAM-II

Beneficios

Propiedades excepcionales del DIVING-PAM-II

Versión AZUL y ROJA DIVING-PAM-II/B y DIVING-PAM-II/R

El color de la luz emitida por el LED primario distingue la versión AZUL de la ROJA del fluorómetro DIVING-PAM-II (Fig. 1). La versión AZUL (DIVING-PAM-II/B) posee un LED azul que emite como máximo alrededor de 475 nm, que es reemplazado por un LED rojo que emite como máximo alrededor de 655 nm en la versión ROJA (DIVING-PAM-II/R). Ambas versiones tienen un segundo LED que proporciona luz roja lejana para la excitación específica del fotosistema I. La segunda diferencia entre las dos versiones es la ventana espectral para la detección de fluorescencia. La versión AZUL detecta la fluorescencia en longitudes de onda > 630 nm, mientras que la versión ROJA detecta la fluorescencia en longitudes de onda > 700 nm (Fig. 2).

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Espectros de emisión LED típicos normalizados a sus valores máximos. La curva azul corresponde al espectro del LED azul del DIVING-PAM-II/B, la curva roja representa el LED rojo del DIVING-PAM-II/R. Ambas versiones del DIVING-PAM-II poseen un LED rojo lejano que emite como máximo por encima de los 700 nm (curva más a la derecha). Se indican la longitud de onda máxima y el ancho completo a la mitad del máximo (entre paréntesis).
diving-pam-ll-2-kasalab-colombia.pngEspectros de transmitancia de los filtros de detección en el DIVING-PAM-II/B (versión AZUL, línea roja) y DIVING-PAM-II/R (versión ROJA, línea roja oscura).
¿Versión AZUL o ROJA?
-Su amplio rango de detección de fluorescencia hace que la versión AZUL sea más sensible que la versión ROJA. En muestras con alto contenido de clorofila, gran parte de la fluorescencia de longitud de onda corta, que potencialmente puede ser detectada por la versión AZUL, es reabsorbida por la clorofila. Por lo tanto, en tales muestras la sensibilidad de la versión AZUL es solo ligeramente mejor que la de la versión ROJA.
-SENSIBILIDAD. La versión AZUL detecta la fluorescencia de la clorofila en longitudes de onda cortas (650 – 700 nm) y en longitudes de onda largas (> 700 nm), pero la ventana de detección de la versión ROJA se limita a longitudes de onda largas (ver Fig. 2 arriba). La ventana de detección más amplia hace que la versión AZUL sea más sensible que la versión ROJA. En muestras con alto contenido de clorofila (por ejemplo, hojas verdes), una gran parte de la fluorescencia de la clorofila en longitudes de onda más cortas es débil porque se reabsorbe dentro de la muestra. En tales muestras, la sensibilidad de la versión AZUL es solo ligeramente mejor que la de la versión ROJA.
-CIANOBACTERIAS. Las cianobacterias suelen absorber mal en el rango azul, pero mejor en el rango rojo. La absorción ineficiente de la luz da como resultado señales de fluorescencia bajas. Por lo tanto, la versión ROJA normalmente se prefiere a la versión AZUL en los estudios de cianobacterias.
LHC II. La fuente de luz actínica azul del MINI-PAM-II/B excita la banda ancha de longitud de onda corta del principal complejo de captación de luz del fotosistema II en plantas superiores y algas verdes, el LHC II. La luz roja del MINI-PAM-II/R excita la banda de longitud de onda larga, comparativamente menor, del LHC II. Por lo tanto, si la excitación del LHC II es importante, la versión AZUL podría ser ventajosa.
-MOVIMIENTOS DE LOS CLOROPLASTOS. El azul es absorbido por los fotorreceptores de luz azul, que pueden estimular respuestas como la reubicación de los cloroplastos en las plantas superiores. La reubicación de los cloroplastos puede afectar la señal de fluorescencia al cambiar la eficiencia de la absorción de la luz. Este efecto es difícil de distinguir de otros mecanismos de extinción de la fluorescencia. La elección de la versión ROJA excluye estos efectos de la luz azul.

Aplicaciones Fluorómetro subacuático con espectrómetro en miniatura Diving-PAM-II

Medición de espectros de PAR, reflectancia y fluorescencia

El espectrómetro miniatura MINI-SPEC es un instrumento para exteriores compacto y robusto para recopilar información espectral del entorno lumínico y de la muestra.

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-Espectros de luz natural medidos justo por encima de la superficie del agua y a distintas profundidades de buceo, como indica la leyenda. A medida que aumenta la profundidad, las intensidades en el rango espectral rojo disminuyeron más que en el rango espectral azul. Esto significa que la fotosíntesis debe aclimatarse a condiciones de poca luz enriquecidas con azul a mayores profundidades. Mediciones realizadas por Sabrina Walz y Jonathan Richir en La STARESO (Station de Recherche Océanographiques et submarines), Córcega, Francia.
diving-pam-ll-4-kasalab-colombia.jpg-Espectros de PAR por encima del dosel (línea roja) o por debajo del dosel (línea negra) normalizados a 870 nm. Los espectros demuestran cómo la absorción foliar afecta notablemente la relación de intensidad “visible/rojo lejano”. Los fotorreceptores fitocromáticos detectan especialmente la relación rojo/rojo lejano. Estos fotorreceptores desencadenan muchos procesos vegetales.
diving-pam-ll-5-kasalab-colombia.jpg-Espectros de reflectancia de una hoja verde y roja (que contiene antocianinas). El máximo a 550 nm del espectro verde corresponde al llamado “espacio verde” de las hojas, en el que la absorción de pigmentos es baja. La línea roja muestra cómo el espacio verde desaparece en presencia de antocianinas que filtran la luz.
diving-pam-ll-6-kasalab-colombia.jpg-Espectros de emisión de fluorescencia de hojas de hiedra normalizados a su longitud de onda máxima. La fluorescencia a una longitud de onda < 700 nm disminuye desde la hoja verde claro hasta la hoja verde oscuro, probablemente debido a una mayor reabsorción de fluorescencia dentro de la muestra (Buschmann C (2007) Photosynth Res 92, 261–271).

Evaluación de la fotosíntesis de macroalgas marinas

Fiordo Kongsfjord, isla Spitsbergen

En la isla de Spitsbergen se ha probado un prototipo del DIVING-PAM en condiciones árticas. El fluorómetro de clorofila se ha utilizado en el fiordo Kongsfjord y se ha expuesto a profundidades de hasta 30 m, a una temperatura de 0 °C. A pesar de estas condiciones algo inusuales, ha funcionado sin problemas. Por primera vez se aplicó el método de pulso de saturación con medición simultánea de luz para evaluar el rendimiento cuántico efectivo del fotosistema II (ΔF/Fm') en macroalgas en su hábitat submarino natural. El aspecto de la regulación del rendimiento cuántico en función del estado de adaptación a la luz a bajas temperaturas fue un tema central de esta investigación. El objeto de estudio fue el alga parda Alaria esculenta , que en Kongsfjord puede alcanzar una altura de hasta 5 m. Esta planta tiene raíces en el fondo marino rocoso y se caracteriza por un tallo erecto, con la parte superior de la "región de las hojas" que llega hasta la superficie del agua. Las mediciones demostraron una clara correlación entre el rendimiento fotosintético de las distintas "regiones foliares" y su distancia a la superficie. Las diferencias más importantes (de aproximadamente un factor de 3) se midieron en el área entre la superficie (rendimiento cuántico más bajo) y una profundidad de 60 cm, donde se observó casi el máximo rendimiento cuántico. Como era de esperar, la supresión relativa de la fotosíntesis alcanzó su nivel más alto en el momento de mayor intensidad de la radiación solar, al mediodía (la llamada depresión del mediodía). Este fenómeno parece reflejar un importante mecanismo de protección contra los efectos nocivos del exceso de energía luminosa (disipación de calor). Esto es especialmente importante cuando las reacciones enzimáticas oscuras se ralentizan a bajas temperaturas.

Especificaciones del modelo DIVING-PAM-II

Suministros de laboratorio Kasalab le ofrece Analizador de Estado de Hojas entre su amplia gama de equipos para laboratorio para la venta en Perú.

Propiedades destacadas del LEAF-STATE-ANALYZER

Características generales Analizador de Estado de Hojas

El LEAF-STATE-ANALYZER LSA-2050 mide la detección de radiación mediante la eficiencia de la excitación de fluorescencia. Las cuatro bandas de onda de excitación diferentes utilizadas se pueden asignar a cuatro grupos de pigmentos: UV-B y UV-A a los ácidos hidroxicinámicos y flavonoides, respectivamente [ 1 ], azul a los carotenoides [ 2 ] y verde a las antocianinas [ 3 ]. Se proporcionan valores de absorbancia que indican la concentración relativa de flavonoides y antocianinas.

La concentración de clorofila se mide mediante el método Cerovic [ 4 ]. El método destaca por su alta respuesta incluso en altas concentraciones de clorofila. El fotosistema II se analiza mediante el método de pulso de fluorescencia/saturación PAM, de eficacia probada [ 5 ]. Con cada medición, se registran los datos del GPS, la orientación de las hojas y la dirección de la radiación solar.

Espectros de LED

analizador-de-hojas-3-kasalab-colombia.png
Espectros de emisión de LED normalizados del cabezal detector del emisor del LEAF-STATE-ANALYZER-2050. Las posiciones de los picos y el ancho total a la mitad del máximo (entre paréntesis) se indican en nm.
analizador-de-hojas-4-kasalab-colombia.pngEspectros de emisión de LED normalizados del cabezal emisor FR, NIR del LEAF-STATE-ANALYZER-2050. Las posiciones de pico y el ancho total a la mitad del máximo (entre paréntesis) se indican en nm.

Solicitudes

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Detección de luz UV-B (transmitancia aparente a 310 nm). Se cultivaron plántulas de frijol de cuatro semanas ( 
Phaseolus vulgaris cv. Saxa) en el campo o en un invernadero, como se indica en la figura. La intensidad de la luz visible en el invernadero fue de aproximadamente un tercio de la intensidad del campo y la radiación UV estuvo prácticamente ausente. Se investigaron los lados superior e inferior de las hojas (ver las etiquetas del eje x). Se muestran los valores medios de cuatro plantas por tratamiento (las barras de error muestran intervalos de confianza del 95%). La detección de luz UV-B fue más eficiente (10%) en el lado superior de las hojas cultivadas en el campo.
analizador-de-hojas-5.2-kasalab-colombia.pngProtección UV-A (transmitancia aparente a 365 nm). La protección UV-A fue más eficaz (10 %) en el haz de las hojas cultivadas en el campo, pero prácticamente no se observó en el envés de las hojas cultivadas en invernadero. (Volver al inicio para obtener información experimental).
analizador-de-hojas-5.3-kasalab-colombia.pngRendimiento cuántico fotoquímico máximo del fotosistema II, FV /FM . El FV /FM más grande se midió en el lado superior de las hojas cultivadas en el campo, el FV /FM más pequeño se midió en el lado inferior de las hojas cultivadas en invernadero. Los datos concuerdan con Wientjes et al. (2013) J Phys Chem B 117: 11200−11208, quienes han atribuido un alto FV /FM a la aclimatación a altas intensidades de luz de la antena de recolección de luz del fotosistema II. (Volver al inicio para obtener información experimental).
analizador-de-hojas-5.4-kasalab-colombia.pngLa concentración total de clorofila ( 
Chl 
a + Chl 
b ) es mayor en las hojas cultivadas en el campo que en las cultivadas en invernadero.

(Volver al inicio para obtener información experimental).
analizador-de-hojas-5.5-kasalab-colombia.pngEspectros de luz medidos al mediodía en el invernadero (línea verde) y en el campo (amarillo oscuro). La relación espectro-invernadero/campo (línea negra) descendió de aproximadamente 0,3 a 500 nm a aproximadamente 0,15 a 400 nm. Esta caída se debe a la absorción de luz azul por el invernadero, que se hace prominente en el rango UV. Los espectros se registraron con un espectrómetro en miniatura MINI-SPEC/MP (ver MINI-PAM-II, Accesorios).

Especificaciones del LSA-2050

Suministros de laboratorio Kasalab le ofrece Autoclaves Verticales AVS Plus entre su amplia gama de equipos para laboratorio para la venta en Perú.

¿Que son las Autoclaves Verticales Línea AVS?

Solución en esterilización y inovador en el mercado, facilita la manipulación de instrumentos, la inserción de cargas en el momento de autoclavar y optimiza el espacio. Las autoclaves son dispositivos diseñados para esterilizar equipos y materiales utilizando vapor a alta presión y temperatura. Son comúnmente utilizadas en entornos como laboratorios, clínicas médicas, odontológicas y de investigación, así como en la industria alimentaria y farmacéutica.

Aplicaciones

Beneficios

Línea AVS
Diferenciales:

◦ Cierre con solamente una manilla
◦ Controlador microprocesado
◦ Tapa con sistema de amortiguamiento
◦ Puede cuentar con opcionales como impresora, sistema de despresurización automática y bomba de vacío, entre otras funcionalidades.

Posee diferenciales que facilitan la manipulación, inserción de cargas y optimización de espacios. Compuesta por las versiones AVs, AVS Plus y AVS Pump, las autoclaves verticales de la línea AVS traen recursos y funcionalidades antes disponibles solamente en equipamientos de grandes capacidades, proporcionando esas facilidades en un equipamiento de dimensiones menores.

Así, mismo laboratorios y clínicas menores pueden beneficiarse, haciendo que el proceso de esterilización sea más fácil, rápido y fiable.